血液/细胞/细菌基因组DNA快速提取试剂he40110-试剂-金山科研平台

血液/细胞/细菌基因组DNA快速提取试剂he40110

2025-08-03

FlashPure Universal Genomic DNA Kit

血液/细胞/组织/鼠尾/细菌基因组 DNA 提取试剂he

（离心柱型）

血液/细胞/细菌基因组DNA快速提取试剂he

目录号:40110

产品内容：

自备试剂：

无水乙醇，RNaseA（可选），溶菌mei（用于革兰氏阳性菌，可选）

保存条件：

室温（15~25℃）

蛋白酶K，室温可保存6个月，4℃保存12个月，~20℃保存2年。

产品简介：

适用于从血液、培养细胞、动物组织、植物组织、鼠尾、细菌等样本中快速提取高质量的基因组DNA。

本试剂盒采用du特的裂解液，利用硅胶膜特异吸附DNA，无需酚氯仿等有毒试剂，也无需进行耗时的醇类沉淀，最大限度的去除蛋白及其他抑制性杂质，得到基因组DNA，无蛋白、核酸酶污染，可直接进行PCR、酶切和杂交等相关分子生物学实验。

具体产品的参数以收到产品说明书的参数为准产品特点:

1.简便快速：30min内可获得高纯度的基因组DNA。

2.安全无毒：无需苯fen/氯仿抽提。

3.高产：典型的产量 200µl全血可提取出 3～6µg基因组 DNA，

4.高纯：OD260/280=1.7～1.9，长度可达30～50kb，可直接进行PCR、酶切和杂交等分子生物学实验。

注意事项:

1.如果裂解液TL、结合液CB、抑制物去除液IR有沉淀析出，可在37℃水浴溶解，摇匀后使用。

2.开始实验前将需要的水浴先预热到70℃备用。

3.为了优良效果，zui hao使用新鲜血液标本或者4℃存放少于3天的标本，不要使用反复冻融超过3次的标本，否则会严重降低产量，不同样品尤其疾病样品中白细胞数量差异可能非常大，因此产量的个体差异也可能非常大。

操作步骤:

第一次使用前，请先在漂洗液WB中加入指ding量无水乙醇，详见瓶身的标签。提示：所有离心步骤必须在室温（15~25℃）下进行。

1.柱平衡：向吸附柱的膜中央（吸附柱放入收集管中）加入100μl平衡液，12,000rpm离心1min，弃滤液，将吸附柱重新放回收集管中。

（请使用当天处理过的柱子）

2.材料处理：

a.血液

取200μl新鲜、冷冻或加入各种抗凝剂的血液，放入1.5ml离心管。

▲如果全血起始量小于200μl，则用1×PBS补足到200μl。

如果起始量介于300μl~1ml之间，则需要先进行红细胞裂解操作: 在样品中加入3倍体积红细胞裂解液颠倒混匀，室温放置10min，期间再颠倒混匀几次。13,000rpm离心20sec(对于1.5ml离心管)或2,000~3,000 rpm离心5 min(对于15 ml离心管)，吸去上清，留下白细胞沉淀（如果看到的是大部分的红色细胞团，则再次重复上述红细胞裂解步骤），加入200 μl 1× PBS，振荡至che底悬浮。

▲如果处理血样为禽类、鸟类、两栖类或更低级生物的抗凝血液，其红细胞为有核细胞，因此处理量仅用5~20μl，可加1×PBS补足到200μl后，进行下面的裂解步骤。

b.培养细胞

①105~106悬浮细胞到一个1.5ml离心管；对于贴壁细胞，应该先用胰蛋白mei消化后吹打下来收集。

② 13,000rpm离心10sec，吸弃上清，留下细胞团。

③ 加入200 μl 1× PBS重悬洗涤细胞，13, 000 rpm离心10 sec，wan全吸弃上清。

④ 再次加入180μl1×PBS，振荡混匀，使细胞che底悬浮。

c.动物组织、植物组织（例如鼠肝脑或者植物叶片）

将20~50mg（脾组织用量应少10mg）新鲜或者解冻的组织用

解剖dao切成小碎块（切成小块可以提高产量）或者在液氮中研磨组

织成细粉后，转入装有180μl组织裂解液TL的1.5ml离心管中，

用大口径枪头吹打混匀。

d.鼠尾

将0.2 ~ 0.5 cm的鼠尾巴尖(即20 ~ 50 mg)剪碎（一定要剪0 ~ 2cm范围内的尾巴尖，否则裂解效果不好），或者在液氮中研磨成细粉后，转入装有180μl裂解液TL的1.5ml离心管中，用大口径枪头吹打混匀。

e.细菌

① 取 0.5~2ml培养菌液（最多不超过2×109个细胞），10,000rpm，

离心30sec，尽可能的吸弃上清，收集菌体。

▲起始处理量可以根据细菌密度、细胞种类、预期产量进行调整，但是离心吸附柱最大吸附能力是30 μg 基因组 DNA，如果菌体过量超过最大吸附能力，反而会严重降低产量。

② 加入200μl1×PBS重悬，10,000rpm离心30sec，吸弃上清。

将细胞振荡或者吹打充分重悬于180μl1×PBS中。

▲注意：对于较难破壁的革兰氏阳性菌，可略过b步骤，加入溶菌mei进行破壁处理，具体方法为：加入180 μl缓冲液(20 mM Tris, pH 8.0；2mMNa2-EDTA；1.2%TritonX~100；临用前加入终浓度为 20mg/ml 的溶菌mei(溶菌mei必须用溶菌mei干粉溶解在缓冲液中进行配制，否则会导致溶菌mei无活性))，37℃处理 30 min 以上。

3.加入20μl蛋白酶K溶液，充分混匀。

a.提取血液基因组时，只需加入ProteinaseK混匀，即可进行下一步。

b.提取细胞基因组时，只需加入ProteinaseK混匀，即可进行下一步。

c.提取动物组织、植物组织的基因组时，加入ProteinaseK混匀后，在56℃放置 1~3小时，每小时颠倒混合样品2~3次，直至组织wan全消化溶解，再进行下一步。

d.提取鼠尾基因组时，加入ProteinaseK混匀后，在56℃放置 3小时（也可以过夜消化），每小时颠倒混合样品2~3 次，直至组织wan全消化溶解，再进行下一步。

e.提取细菌基因组时，只需加入ProteinaseK混匀，即可进行下一步。

4.（可选步骤）加入5 μl RNase A (100mg/ml) 溶液，振荡混匀，室温放置 5~10min。

5.加入200μl结合液CB，充分振荡混匀，70℃水浴或金属浴处理10min。

6.冷却后加100 μl 无水乙醇 (或异丙醇)，充分振荡混匀，此时可能会出现絮状沉淀，短暂离心以去除管盖内壁水珠。

7.将所得溶液和絮状沉淀加入一个DNA吸附柱中，（吸附柱放入收集管中）13,000rpm离心1min，DNA被吸附在膜上，倒弃滤液。

8.加入500μl抑制物去除液IR，13,000rpm离心30sec，倒弃滤液。

9.加入600μl漂洗液WB（请检查是否已加入无水乙醇），13,000rpm离心30sec，倒弃滤液。

10.重复步骤9一遍。

11.将DNA吸附柱放回空收集管中，13, 000 rpm离心2 min，尽量除去漂洗液，以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。

12.取出DNA吸附柱，放入一个干净的1.5ml 离心管中，向吸附膜的中央加入100 μl洗脱缓冲液EB（洗脱缓冲液事先在80 ~ 100℃水浴中预热可以提高产量），室温放置3 ~5 min，13, 000rpm离心1min。

▲可将第一次洗脱所得溶液重新加入离心柱中，室温放置2min，13,000rpm离心1min。可以提高浓度10%左右。

13.DNA 可以存放在~20℃，如果要长时间存放，可以放置在~70℃。