gDNA 残留清除剂
gDNA Eraser Reagent
gDNA残留清除剂 RNA提取配套产品
目录号:91210
产品内容:
自备试剂:
氯仿、异丙醇、RNase-FreeH2O、75%乙醇(用 RNase-FreeH2O配制)
保存条件:
2~8℃避光保存,有效期 24个月。
产品简介:
非酶法清除RNA样品中的基因组DNA污染。每ml试剂处理~100μgRNA
样品。
很多用户在提取RNA的时候由于操作因素或者RNA抽提试剂质量问题,造成所得到的RNA样品中混杂基因组污染,在普通或者变性电泳的时候直接肉眼可见程度不一的DNA污染杂带。即使用市售的RNase-free的DNase消化 DNA也不容易清除wan全,而且常常导致RNA降解。DNAeraser基因组DNA污染清除剂不含DNA酶,在强烈抑制RNA酶的条件下che底清除RNA样品中的污染DNA杂带和蛋白质污染,同时进一步纯化RNA。最后通过异丙醇沉淀回收的RNA纯度ji高,wan全不影响原有RNA质量和下游应用。
操作步骤
以下操作以 100μl RNA溶液为例,为方便操作可用 DEPC处理水将不足100μl的 RNA 样品的体积补充到 100 μl。(RNA浓度很低的不要补水。)
1.每 100μlRNA溶液加入1ml基因组DNA污染清除试剂。充分振荡混匀,冰上放置 1 分钟。
2.加入200ul氯仿,盖好管盖,剧烈充分振荡 15sec,冰上放置 1min。
3.于 4℃, 12,000rpm离心10min。
4.取上清约 500μl转移到新管。勿触动中间相,否则重新离心。
5.可选步骤:加入核酸助沉剂 PloyCarrier(Cat:91117)2μl,充分混匀。加入核酸助沉剂后 RNA 特别是低浓度 RNA 的回收率显著增加,并使 RNA沉淀容易辨认。核酸助沉剂不影响 RNA及其下游实验。如果原样品的 RNA 浓度较高,可以省略此步骤。
6.加入等体积的异丙醇,颠倒混匀,室温放置 10min。
7.于 4℃,12,000rpm离心 10min,弃上清。
8.加入 1ml 75%乙醇洗涤沉淀。于 4℃,12,000rpm离心 3min,倒出上清,注意不要倒出沉淀,剩余的少量液体短暂离心,然后用枪头吸出,注意不要吸弃沉淀。
9.室温放置 2~3 min,晾干。加入适量的 RNase-FreeddH2O,吹打混匀,充分溶解 RNA。(注意:沉淀不要过分干燥,以免难于溶解。)
10.得到的 RNA,可直接用于下游戏实验,或于-70℃保存,防止降解。
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