FlashPure fungus GenomicDNA Kit

真菌基因组DNA 提取试剂he

（离心柱型）

真菌基因组DNA快速提取试剂he（离心柱型）

目录号:40411

自备试剂：

无水乙醇

室温（15~25℃）

适用于从多种真菌的不同部位的组织中快速提取高质量的基因组DNA，du特配方的缓冲液体系能有效去除植物组织中的多糖、多酚复合物和酶抑制剂，基因组DNA选择性吸附于硅基质膜上，再通过快速的漂洗、离心等步骤，去除其他杂质。提取过程不需要氯仿等有机试剂抽提，安全快捷。使用本Kit提取的植物基因组DNA，可直接进行PCR、酶切和杂交等分子生物学实验。

1.简便快速：30min内可获得高纯度的基因组 DNA。

2.纯度高：OD260/280=1.7～1.9，可直接进行PCR、酶切和杂交等实验。

3.安全无毒：安全、无毒，无需苯fen/lv仿抽提。

1.若BufferLP1或BufferLP3有沉淀析出，可在37℃水浴溶解，摇匀后使用。

2.所有离心步骤均需要使用台式离心机，室温下离心。

3.按要求在BufferLP3和BufferWB2中加入无水乙chun。

第一次使用前，请先在 BufferLP3和 BufferWB2中加入指ding量无水乙醇，加入体积详见瓶身的标签。

提示：所有离心步骤必须在室温（15~25℃）下进行。

1.取真菌新鲜组织100mg或干重组织20mg，加入液氮充分碾磨，倒入

1.5ml离心管中。

2.加入400μlBufferLP1和4μlRNaseA（10mg/ml），旋涡振荡 1min，室温放置10min。

3.加入130μlBufferLP2，充分混匀，旋涡振荡1min。

4.12,000rpm离心 5min，将上清移至新的离心管中。

（注意：只取上清液，不要吸取沉淀组织，大约 400μl左右）

5.加入1.5倍体积的BufferLP3（例：400μl上清液加600μlBufferLP3），立即充分振荡混匀 15 sec，此时可能会出现絮状沉淀。

6.将上一步所得溶液和絮状沉淀都转入到吸附柱中（吸附柱放入收集管中），12,000rpm离心30sec，DNA被吸附在膜上，弃收集管中废液。

（注意：吸附柱的最大容量是750μl，超过此体积，可分2次进行）

7.向吸附柱内加入 500μl的 BufferWB2，室温 12,000rpm离心 30sec，弃收集管中废液。

（注意：如果吸附柱膜呈现绿色，可向吸附柱中加入500μl无水乙醇，

12,000rpm离心30sec，倒掉废液，将吸附柱放入收集管中）

8.重复步骤 7一次。

9.室温12,000rpm离心2min，甩干吸附膜上的残留液体。

（注意：此步不能省略，否则残留乙醇会影响基因组 DNA 的后续使用）

10.取出吸附柱，放入一个新的 1.5ml 离心管（自备）中，在吸附膜的中央加入 50~100μlBufferEB，室温放置 2min，12,000rpm离心 1min，管底溶液即基因组 DNA。

（注意：为增加洗脱效率，可将洗脱液 BufferEB在 60℃预热。如果需要使用去离子水洗脱，可用NaOH调整其 pH值在 7.0~8.5之间，为了增加 DNA 回收率，可将得到的溶液重新加入到吸附柱中，室温放置 2 min，再次离心收集）

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