UniversalSYBRGreenqPCRMix荧光定量71600

2025-08-03

2 x Universal SYBR Green qPCR Mix

Universal SYBR Green qPCR Mix荧光定量

目录号:71600

产品内容

保存条件

-20℃保存,有效期24个月。使用前,充分融解,轻轻颠倒混匀,短期使用可放在4℃,避免反复冻融。

产品简介

2× Universal SYBR Green qPCR Mix是SYBR Green I嵌合染料法专用的qPCR试剂,为2x预混液,包含除引物和DNA样品以外的所有qPCR组分,可减少操作步骤,缩短加样时间,降低污染几率。其核心组分是全新的Hotmaster Taq DNA聚合酶,配合精心优化的Buffer体系,有效抑制非特异性扩增,可对宽广浓度范围的模板进行准确定量,获得稳定可靠的qPCR结果,具有灵敏度高、特异性强、稳定性好等特点。

预混液中含有通用型ROX,适用于所有qPCR仪,使用qPCR Mix时不需要额外添加ROX来校正仪器。

操作步骤:

1.将DNA模板、引物、2 x Universal SYBR Green qPCR Mix、RNase-Free H2O溶解并置于冰上备用。

2.冰上配制qPCR反应体系:(以20μl反应体系为例)

注意:

1) 推荐模板加样量为1-2μl / 20μl反应体系,cDNA原液≤总反应体系的10%,基因组DNA的量为10-100 ng。因不同种类的DNA模板中含有的靶基因拷贝数不同,可对模板进行梯度稀释,以确定最佳的模板使用量。

2) 通常推荐引物浓度为0.2 μM,就可以得到较好的结果,反应效果不佳时可在0.1 - 1.0 μM范围内进行调整。扩增效率不高的情况下,可提高引物浓度;发生非特异性反应时,可降低引物浓度,由此优化反应体系。

3. qPCR反应程序

注意:

1) 本产品兼容性强,绝大多数情况下使用二步法和三步法均可获得良好效果。一般来说,二步法扩增特异性高,三步法扩增效率高。如果融链曲线较差,可以尝试两步法扩增或提高退火温度;如果因使用Tm值较低的引物等原因,得不到良好的实验结果时,可尝试加长延伸时间或者进行三步法PCR扩增。

2) 根据引物的Tm值进行退火&延伸(退火)温度的设定;

3) 延伸(退火&延伸)时间的设置还需要根据您所使用的qPCR仪所需要的最短数据采集时间自行调整。

4) 融解曲线分析请以所使用的荧光定量PCR仪推荐的程序进行设定。

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