T4 DNA Ligase

T4 DNA Ligase T4原理载体及其他

目录号：42017

试剂盒组成、包装：

浓度：5U/ml

储运温度：-20℃（保存6个月）

制品说明：T4 DNA Ligase是从表达T4 DNA Ligase基因的大肠杆菌经诱导表后分离纯化而来的。它催化相邻DNA链的的5’-磷酸末端和3’羟基末端以磷酸二酯键结合反应。该酶催化平滑末端或粘性末端DNA的连接，修复双链DNA、RNA、DNA/RNA杂交中的单链中的单链切口。

适用范围：（1）DNA片段和载体DNA快速连接；

（2）限制酶切片段的克隆；

（3）将DNA片段与Linker或Adaptor连接。

酶贮存缓冲液：

20mM Tris-HCl (pH7.5)，0.1 mM EDTA，1mM DTT，50 mM KCl，50% glycerol。

10×Ligation Buffer：

400 mM Tris-HCl，100 mM MgCl₂，100 mM DTT，5 mM ATP(PH7.8)，其他成分。

建议连接反应体系：(以10 μl反应体系为例)

反应循环的设置：

粘端连接：22^oC反应10分钟(可根据需要延长到1小时)；也可以16^oC反应1-5小时。

平端连接：22^oC反应2小时或16^oC过夜。

T4 DNA Ligase T4原理载体及其他