Pfu DNA

2025-07-27

Pfu DNA

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目录号规格备注价格说明书下载E002-01A250U含dNTP230元E002-01BA包装×5含dNTP1035元E002-02A250U不含dNTP180元E002-02BA包装×5不含dNTP810元

· Pfu DNA 聚合酶内容 (250 U)

Pfu DNA聚合酶(5 U/μl)50 μldNTP 混合液 (各10 mM)250 μl10 × Pfu Buffer with Mg2+1 ml

· 聚合酶说明本酶为Pyrococcus furiosus中分离的pfu DNA pol 基因在大肠杆菌中进行表达后经多次纯化分离而得。聚合酶具有3’-5’外切酶(校正)活性,当聚合反应发生碱基错配时,聚合酶的校正活性可将错配的碱基切除。聚合酶为使用范围zui广的高保真DNA聚合酶,其错误率仅为1.3x10-6,推荐聚合酶用于需高保真的PCR反应。· 聚合酶用途用于要求保真度比较高的PCR反应,包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突变、全基因合成等(参见 Sinobio 实验方案)。· 聚合酶产品特点高保真:聚合酶是使用zui广泛的高保真酶,其保真度为普通Taq酶的10倍。灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段(图例一)。快捷:PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配置。便利:10μl, 25μl 或50μl体系全部适用。· 质量保证经多次柱纯化,SDS-PAGE检测纯度大于95%;PCR方法检测无大肠杆菌DNA残留,无核酸内、外切酶污染。· 聚合酶使用建议

聚合酶产生的PCR产物为平滑末端,无3’端"A"突出,其PCR产物的克隆有两种方案。1. PCR前引物进行5’端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平滑末端的载体中(参见 Sinobio实验方案)。2. 将产物3’末端加A后再与T-Vector连接(参见 Sinobio 实验方案)。3. 由于聚合酶的校对活性可引起引物从3′端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度,理想的引物长度为20-30碱基。另外为了减少由3′-5′外切酶活性引起的引物降解,尽量在冰上配置反应体系,并zui后加入Pfu酶。· 相关图片

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