TaKaRa BcaBEST™ RNA2步法反转录PCR扩增试剂盒

2024-07-23

品名: TaKaRa BcaBEST™ RNA2步法反转录PCR扩增试剂盒

品牌: TaKaRa

型号: RR023B 产品详情 金山科研平台现货促销

商品名称:BcaBEST RNA PCR Kit Ver.1.1

商品编号:SPU2021050500

上架时间:2022-01-06

■ 制品内容 (Code No.: RR023A : 100次量*1)
BcaBEST Polymerase (22 U/μl)50 μlRNase Inhibitor (40 U/μl)25 μlRandom 9 mers (50μM)50 μlOligo dT Primer (50μM)50 μlRNase Free dH2O1 mlBca-Optimized Taq(5 U/μl)25 μl2 ×Bcalst Buffer1.25 ml × 2 支5 ×Bca2nd Buffer800 μldNTP Mixture (各10 mM)50 μlMgSO4(25 mM)500 μlControl F-1 Primer*2(20μM)25 μlControl R-1 Primer*3(20μM)25 μlPositive Control RNA (2 × 105copies/μl)25 μl*1 反转录反应10μl,PCR反应体系50μl,可使用100次。*2 Positive Control RNA用上游引物。*3 Positive Control RNA用下游引物。
■ 制品说明
PCR(Polymerase Chain Reaction;聚合酶链式反应)是一种体外扩增DNA的简单而有效的方法。虽然原理上PCR法是扩增DNA,RNA不能直接被扩增,但是经过反转录酶的作用把RNA反转录成cDNA后,PCR法便可应用于RNA的解析了。目前,此方法已广泛应用于RNA的构造解析、cDNA的克隆及RNA水平上的表达解析等多种领域。本试剂盒含有从RNA反转录到cDNA以及扩增此cDNA所必需的全部试剂,即用Bacillus caldotenax来源的BcaBEST Polymerase从RNA合成cDNA,然后在同一试管内加入应用LA PCR技术研制的Bca-Optimized Taq扩增此cDNA。此外,使用BcaBEST Polymerase进行反转录反应的最适温度是65℃,所以对具有复杂二级结构的RNA特别适合。
■ 各种引物的序列
引物名称各引物序列Random 9 mers5′-NNNNNNNNN-3′Oligo dT Primer包含Takara特别设计的dT区域。本序列与TaKaRa RNA PCR Kit(AMV)Ver.3.0(Code No. RR019A/B)及TaKaRa RNA LA PCR Kit(AMV)Ver.1.1(Code No. RR012A)中的Oligo dT-Adaptor Primer的序列不同,没有M13 Primer M4区域。Control F-1 Primer5′-CTGCTCGCTTCGCTACTTGGA-3′Control R-1 Primer5′-CGGCACCTGTCCTACGAGTTG-3′
■ 试剂盒的原理
BcaBEST RNA PCR的原理图
■ 试剂盒特点
RNA模板适用于所有RNA (对富含GC的mRNA及具有复杂二级结构的mRNA特别有效)扩增片段大小5 kb以下反转录酶BcaBEST Polymerase (最适温度65℃)DNA聚合酶Bca-Optimized TaqRNase Inhibitor必须使用 (试剂盒中含有)合成cDNA第一条链的引物Random 9 mers、Oligo dT-Adaptor Primer或特异性下游PCR Primer可供选择操 作在同一反应管中进行 (反转录酶在进行PCR反应前须进行高温失活)
BcaBESTRNAPCRKitVer.1.1
品牌CodeNo.产品名称包装量
TakaraRR023ABcaBESTRNAPCRKitVer.1.1100次
TakaraRR023B(A×2)BcaBESTRNAPCRKitVer.1.1200次

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