125-05061，质谱级赖氨酰肽链内切meiLysyl Endopeptidase^®

125-05061，质谱级赖氨酰肽链内切meiLysyl Endopeptidase^®产品简介：

产品品牌：Wako

产品名称：质谱级赖氨酰肽链内切meiLysylEndopeptidase®

产品货号：125-05061

产品规格：20 ug×5

FUJIFILM Wako质谱级赖氨酰肽链内切酶

　本产品是质谱分析前处理时常用的蛋白分解mei即赖氨酰肽链内切mei，该mei可以特异性切除赖氨suan基团C末端的多肽，可用于蛋白测序分析和 Lys-X 化合物的mei合成。若同时使用赖氨酰肽链内切mei和胰mei，可更好地切断赖氨suan基团的多肽，增加多肽的数量。产品已按照使用习惯做成小包装，是方便使用的冷冻干燥品。20 μg/支可用于100-200个样品的凝胶内消化。

来源：细菌

外观：冻干粉（包含２ mmol/L Tris-HCl 缓冲液，pH８）

活性：0.03～0.07 AU/vial

分子量：27,000（琼脂糖过滤），30,000（SDS-PAGE）

溶解性：溶于水或缓冲液

稳定性：溶解于 pH 值 5.0-12.0 的 Tris 缓冲液中，可在４℃稳定保存２年；在 pH 值 6.0-11.0、30℃时能稳定保存，但温度超过50℃时不稳定。

最适pH值：9.0~9.5

等电点：6.9~7.0

底物特异性：

可水解底物——Tos-Lys-OMe、Bz-Lys-NH₂、Bz-Lys-pNA、Lys-pNA

不可水解底物——Bz-Arg-NH₂、Bz-Arg-pNA、Arg-pNA

抑制剂：DFP、PMSF、TLCK

◆特点

● 高特异性、高蛋白质消化率、适用于蛋白质谱分析

● 提高裂解效率、增加肽段数量

● 根据使用量特意制备小包装，方便使用

◆应用

　　分别采用胰蛋白mei（Tp）、赖氨酰肽链内切mei（Lys-C）和 Tp与Lys-C 联用进行胶内mei切的效果比较。

　　牛血清蛋白 BSA 的条带（100 ng）通过 SDS-PAGE 获得，然后分别用 Tp、Lys-C 和 Lys-C+Tp 进行mei切，再用 MALDI-TOFMS 法进行分析。

　　这些蛋白mei的实验效果见下表。

表 1：Tp、Lys-C 和 Lys-C+Tp 的结果对照

这些结果表明 Lys-C mei解的错误裂解率*低。Tp mei解时加入 Lys-C 后，错误裂解率有所降低，同时，可以鉴定出更多的多肽。

胰蛋白mei（Tp）（图 ａ）和赖氨酰肽链内切mei（Lys-C）+Tp（ 图 ｂ）mei切后的质谱结果对照图。

Lys-C+Tp mei切后，可以在 m/z=2000 时得到吸收峰，而单独的 Tp mei切在 m/z=2000 时没有吸收峰。该结果表明 Lys-C 可以提高测序覆盖度。

( 数据由大阪医疗中心和妇婴健康研究所Ｙ. Wada 博士提供 ）

赖氨酰肽链内切mei

赖氨酰肽链内切mei，最初由 Masaki 等人从土壤细菌中分离得到。该mei可以特异性剪切赖氨suan残基Ｃ末端和Ｓ-氨乙基半胱氨suan残基的肽键，用于蛋白测序和 Lys-X 化合物的mei催化合成。该mei稳定性高，在４Ｍ尿素或 0.1% SDS 溶液中 30℃ 孵育６小时之后，仍然拥有完整的生物活性。

FUJIFILM Wako质谱级赖氨酰肽链内切酶