品名: 白鲨Biosharp BL926A DiD (细胞膜远红外荧光探针)
型号: BL926A 产品详情 金山科研平台现货促销
产品简介:
DiD,DiO,DiI和DiR染料是一族亲脂性的荧光染料,可以用来染细胞膜和其它脂溶性生物结构。当与细胞膜结合后其荧光强度大大增强,这类染料有着很高的淬灭常数和激发态寿命。一旦对细胞染色,这类染料在整个细胞膜上扩散,最佳浓度时可以使整个细胞膜染色。它们的荧光颜色区分明显:DiI(红色荧光),DiO(绿色荧光),DiD(远红外荧光)和DiR(深红色荧光),这使得他们可以用来对活细胞进行多色成像和流式分析。
DiD是DiI的类似物,但具有更长的激发和发射波长,为远红外荧光,在一些细胞和组织染色中更有优势,特别适合用于进行多种荧光的同时染色。DiD可被633nm的氦-氖激光所激发,DiD在进入细胞膜之前荧光非常弱,仅当进入到细胞膜后才可以被激发出很强的荧光。DiD被激发后可以发出远红外的荧光,最大激发波长为644nm,最大发射波长为663nm。
DiD被广泛用于正向或逆向的,活的或固定的神经等细胞或组织的示踪剂或长期示踪剂。还用于检测细胞的融合和粘附,检测发育或移植过程中细胞迁移,通过FRAP检测脂在细胞膜上的扩散,检测细胞毒性和标记脂蛋白等。
DiD染色后可以兼容免疫荧光实验。建议使用免疫染色通透液(Saponin)或使用洋地黄皂苷配制的不会溶解细胞膜的通透液进行通透,其它去垢剂配制的通透液可能会溶解细胞膜上的脂类物质,造成DiD失去结合位置,最终导致DiD的染色失效。但通透也可能会影响DiD在细胞膜上的定位并会增加细胞内的染色,具体实验中需根据实验的需求选择合适的细胞通透液。
产品信息:
英文名:DiIC18(5);1,1'-Dioctadecyl-3,3,3',3'-Tetramethylindodicarbocyanine Perchlorate
分子式:C61H99ClN2O4
分子量:959.91
纯度:≥95%
使用方法(仅供参考):
一、DiD细胞膜染色液制备
1.配置DMSO或EtOH储存液:用DMSO或EtOH配置浓度1-5 mM的储存液。
2.工作液制备:用合适的缓冲液(如无血清培养基,HBSS或PBS)稀释储存液,配制浓度为1-5 µM的工作液。
注:工作液的最终浓度是根据不同细胞和实验的经验来配制,可以从推荐浓度的十倍以上寻找最佳条件。
二、细胞染色
a.对于悬浮细胞
1.悬浮细胞密度为1×106/mL加入到工作液中。
2.在37℃培养细胞5~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。
3.1000-1500rpm离心5分钟。
4.去除上清,再次缓慢加入37℃预温的培养液。
5.重复步骤3和4,两次以上。
b.对于贴壁细胞
1.吸去多余的培养液。
2.加入染料工作液,轻轻晃动使染料均匀覆盖所有细胞。
3.在37 ℃培养细胞5~20分钟,不同的细胞最佳培养时间不同。
4.吸去染料工作液,用培养液清洗2~3次,每次用预温的培养基覆盖所有细胞,培养5~10分钟,然后吸干培养基。
三、结果分析
显微镜下观察或流式细胞仪检测
注意事项:
1、荧光染料均存在淬灭问题,请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
2、本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品。
3、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存条件:
-20℃干燥避光保存,有效期一年。
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