福尔根DNA染色液
产品简介:
脱氧核糖核酸(DNA)染色方法有Feulgen法、甲基绿-派洛宁法、吖啶橙荧光法等,其中zui经典的是Feulgen法,该法是一种经典的酶组织化学法。
NobleRyder Feulgen Stain 原理在于DNA经温和的弱酸(例如盐酸)水解后,嘌呤碱与脱氧核糖间的糖苷键被打开,并且使脱氧核糖与磷酸间的磷酯键断开,在脱氧核糖的一端形成游离的醛基。醛基在原位与 Schiff试剂结合,形成紫红色化合物,使细胞内含有DNA的部位呈紫红色。紫红色的产生是因为反应产物的分子内有醌基(醌基是一个具有颜色的发色团,所以凡含有DNA的部位就呈紫红色。该水解作用不影响核糖-嘌呤结合键,因此RNA用此法处理后则分解,所以该法不适用于证明RNA。
产品组成:
编号 名称 | D6610 3×50ml | Storage |
试剂(A):Schiff Reagent | 50ml | 4℃ 避光 |
试剂(B): SO2水 | B1:弱酸溶液 | 50ml | RT |
B2:亚硫酸盐溶液 | 50ml | RT |
使用说明书 | 1份 |
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自备材料:
1、蒸馏水、
2、恒温箱
操作步骤(仅供参考):
(一)石蜡切片染色:
1、组织固定:Carnoy固定石蜡切片较好,10%福尔马林亦可,不宜采用Bouin固定液。
2、配制弱酸工作液:按弱酸溶液:蒸馏水=1:4配制,即取1份弱酸溶液、4份蒸馏水,充分混合,即获得弱酸工作液。
3、石蜡切片脱蜡至蒸馏水。
4、入弱酸工作液,室温浸洗一下。
5、切片入预热至60℃的弱酸工作液,孵育8min。
6、切片入室温的弱酸工作液中冲洗1min。
7、蒸馏水冲洗。
8、切片入Schiff Reagent,室温避光染色30~60min。
9、在上述染色过程中,配制SO2水工作液。按弱酸溶液:亚硫酸盐溶液:蒸馏水=1:5:94 配制,即取弱酸溶液1份、亚硫酸盐溶液5份、蒸馏水94份,充分混合,即配即用。
10、用新鲜配制的SO2水工作液洗切片3次,每次90s。
11、蒸馏水中洗净。经系列乙醇脱水。二甲苯透明并封片。
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