bio-rad伯乐电击杯爆杯原因

2023-05-22

有过一次爆杯的经验,但是我后来还是用那个杯子转了好几次,还是可以用的。但是对爆杯这个事情,不知道你是否找到原因了呢?我先说说我的感受吧。


1.质粒或者感受态离子强度太高。上次我爆杯就是因为我电转的是连接产物,连接buffer里面很多离子的,所以造成爆杯。感受态离子强度也一样。说明书上都是用的甘油啊,山梨醇啊等等这些离子强度低的溶液来制备感受态。

2.不知道你转的是细菌或者是酵母?你的程序选对了没有?


两点:第一:连接液离子强度太大,第二:杯子没刷干净,有上次的死细胞质内容物导致离子强度过高,另外杯子预冷时间不够也可能有点关系。

杯子一般要先用去离子水洗,再用无水乙醇浸泡,用注射器反复清洗。后在工作台开风吹干!~

溶液离子高导致。当电转杯的溶液离子过高时,容器无法承受,就会出现爆杯的情况。


0.4  cm  间距电击杯:宽间距、低场强、应用于哺乳动物细胞和其它真核细胞

0.2  cm  间距电击杯:窄间距、高场强、应用于酵母、细菌和其它真核细胞

0.1  cm  间距电击杯:最窄间距、极高的场强,浅底用于小体积样品(40–80ul)应用于酵母和细菌转化


电击杯的特点包括:

1、保证效率——使用这些电击杯确保最高电转化效率,制作精良的电击间距公差保证了实验间的重复性;

2、确保无菌——每一个电击杯都在净室环境下装配、洗涤、加盖和包装,并经过gamma射线灭菌;

3、结构坚固——耐用的聚碳酸酯能承受极高的电压;

4、标有颜色的盖和包装袋——可快速地区分不同规格的电击杯;

5、一致的腔体形状——无缝塑料模制避免了渗漏并保证铝板平行—这是均一的样品处理和安全性的关键所在;

6、平滑的电极表面——铝片经过11步严格的蚀刻和清洗处理,确保对整个样品的一致性脉冲传送。


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