Bio-Rad数字微滴知识PCR(ddPCR)耗材试剂

2023-08-06

ddPCR技术已经应用在多个方面,包括定量癌症标志物、测定病毒载量、区分基因组变异、验证新一代测序的结果、基因表达分析、转基因检测以及环境监测等等。此外,您还可以利用ddPCR技术来检验CRISPR/Cas9的基因组编辑效果。

目前市场主流的是三家:

1、赛默飞世儿的3D数字PCR(芯片式数字PCR),主要是将20ul反应体系分散到20000个微孔中进行反应,变成20000个反应体系,PCR反应结束后,采用CCD拍照,数阳性反应孔。

2、Bio-Rad的微滴数字PCR(油包水原理):将20ul反应体系采用液滴反应器形成20000个油包水反应体系,PCR反应结束后,才有流式细胞术的原理,检测每一个液体,数阳性反应的液滴数量。

3、RainDance 的数字PCR(油包水原理)、原理与伯乐微滴数字PCR相同,但是其液体形成能力比伯乐强很多,理论上可以产生1000万个小油滴。

相对于荧光定量PCR(qPCR)而言,dPCR具备以下优势:

无需依赖参考物或标准品

通过使用更多PCR复制物能够提高精确度

对抑制剂具有较高耐受性

能够分析复杂混合物

对较小倍数改变的线性检测


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