产品英文名称:BAPTA-AM
产品中文名称:BAPTA-AM pH 胞内钙掩蔽试剂
BAPTA-AM 产品简介
• 分 子 式: C34H40N2018
• 分 子 量: 764.68
• 外 观: 白色粉末
• 别 名: BAPTA-AM
• 纯 度: 95%以上(Titration)
• 储存条件: -20℃
• 运输条件: 室温
BAPTA-AM 的产品特性
BAPTA是一种钙选择性螯合剂。它基本的螯合单位和EDTA类似,只是两个脂肪氮被芳香氮所替代。因此,BAPTA在生理pH下不会被质子化。BAPTA的pKa3为5.47,pKa4为6.36。这个特点显示了去质子化的步骤并不包含在Ca的螯合步骤中。由于不受质子的干扰,它的螯合率比EGTA要高很多。BAPTA-AM是BAPTA的乙酰甲酯衍生物,通过AM法,能被轻易负载到细胞中。BAPTA-AM对于细胞内钙离子的监控是非常有用的。
BAPTA-AM 的操作说明
(1) 溶解方法
•配制50 mM stock solution
例1) 使用100μl DMSO时,(BAPTA-AM的分子量=764.68)
50 mmol/L = (X g/764.68) mol/100 × 10-6 L
X g/764.68 = 50 × 10-7 mol
X =0.003823 g = 3.82 mg 例2) 使用20mg BAPTA-AM时,
50 mmol/L = (20 mg/764.68) mol/X L
X =0.00002615 ÷ 0.05 = 523μl
例3) 使用5mg BAPTA-AM时,
50 mmol/L = (5 mg/764.68) mol/X L
X =0.000006538 ÷ 0.05 = 130μl
例4) 使用25mg BAPTA-AM时,
50 mmol/L = (25 mg/764.68) mol/X L
X =0.00003269 ÷ 0.05 = 654μl
*保存stock solution的方法和保存时间
由于AM体遇水容易分解。所以我们推荐现配现用。
使用无水DMSO,再冷冻的条件下,可以保存约1-2个月。
(2) 使用方法
•稀释stock solution,添加细胞。
稀释浓度:少的 6 – 8 μM , 多的50 μM
例1) 8 μM, 使用10μl 50 mM BAPTA-AM stock solution
8 μM = 50 mM ×10μl / Xμl
X = 62,500μl = 62.5 ml
例2) 50 μM, 使用10μl 50 mM BAPTA-AM stock solution
50 μM = 50 mM ×10μl / Xμl
X = 10,000μl = 10.0 ml
*关于细胞的量,不同的细胞使用不同的细胞量。
一般来说,和Fura2-AM,Fluo3-AM一样的量。
论文里面有如下的条件。请参考。
例1) 1.75×10-4 cells/cm2, 25 μM BAPTA-AM
•培养
培养时间:20 – 60 分钟
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