英文名称：Collagenase Assay Kit

中文名称：胶原蛋白酶检测试剂盒

胶原酶检测试剂盒 产品介绍：

胶原蛋白酶是基质金属蛋白酶（MMP）家族成员，可降解胶原蛋白Ⅰ,Ⅱ和Ⅲ。至少确认存在3种不同形式胶原蛋白酶（MMP-1, MMP-8和MMP-13）。胶原蛋白酶产生于许多骨髓和非骨髓细胞。强劲的胶原蛋白酶已在生理学环境中发现，比如产后子宫组织中和蝌蚪变态后。病理学环境比如炎症和肿瘤转移中也发现有胶原蛋白。三种类型胶原酶的特异性酶作用底物几乎是相同的。然而，个别胶原酶可能发挥不同的生理学和病理学作用，胶原蛋白更新取决于组织和细胞类型。有趣的是有报道称MMP-13消化分解Ⅱ型胶原蛋白比分解Ⅰ型胶原快十倍。

试剂盒设计用于检测哺乳动物胶原酶活性，使用FITC（异硫氰酸荧光素）标记游离端肽的可溶液性牛Ⅰ型胶原（#3001）或牛Ⅱ型胶原（#3002）作为底物。两小时内即可检测出结果，比传统检测方法（胶原凝胶作为底物）快十倍，且比用放射性同位素标记的胶原蛋白检测更灵敏。

检测原理：哺乳动物胶原酶切割胶原蛋白分子中三条α链，形成3/4和1/4胶原蛋白片段。这些肽段的变性温度为34-35℃和28-29℃，而完整胶原蛋白变性温度为40℃。因此，这些切割的肽段可在35℃时变性为无规卷曲构象，其可用有机溶剂提取。通常变性时间为60分钟，为缩短变性时间，可添加蛋白酶进一步消化胶原酶降解产物。

检测步骤：1)激活样本中潜在的无活性胶原酶

2)与FITC标记的可溶性胶原蛋白反应

3)切割的胶原蛋白片段变性进一步降解为更小肽段

4)用有机溶剂提取肽段并测定提取的荧光强度（FI）