罗氏地高辛标记DNA和检测试剂盒Ⅰ(第一代,NBT/BCIP显色检测)

2023-08-02

产品英文名称:DIG High Prime DNA Labling and Detection Starter Ⅰ

产品中文名称:地高辛标记DNA和检测试剂盒Ⅰ

地高辛标记DNA和检测试剂盒Ⅰ 产品介绍:

高效地高辛(DIG)标记探针可应用于RNA杂交,DNA杂交,点杂交分析等,同时也可用于克隆和噬菌斑杂交。试剂盒使用DIG-11-dUTP(碱不稳定性)随机引物标记DNA模板并对DIG标记杂交物进行显色检测。试剂盒备有结合储存液NBT/ BCIP,现有的封闭液和DIG易杂交颗粒。高效DIG混合物包含稳定Klenow enzyme(克列诺酶),核苷酸,引物和反应缓冲液。

检测原理: 高效DNA地高辛标记检测试剂盒I是用地高辛(Digoxigenin,简称DIG;又称异羟基洋地黄毒甙元,是一种类固醇半抗原分子)标记的DNA探针,应用于分子杂交和随后的显色反应检测。罗氏公司的该试剂盒检测主要分三阶段进行:1)DNA标记:根据随机引物标记技术,生成DIG地高辛标记的DNA探针。2)杂交:按照标准杂交方法进行,将地高辛标记的DNA探针用于核酸点杂交,可选择带正电的尼龙膜或纯硝酸纤维素膜作为杂交膜。 3)免疫学检测:首先将标记有AP的地高辛抗体与杂交探针免疫结合;通过检测碱性磷酸酶与NBT/BCIP底物进行显色反应的数值,从而达到免疫检测的目的。

灵敏度和特异性:标准检测使用1µg线状pBR328。通常需要0.8µg标记DNA(标记1小时后)和2.3µg标记DNA(20小时反应后)。在点杂交过程中,16小时显色后(探针浓度20ng/ml)可以检测到0.1pg同源DNA。DNA印迹中,加载1µg消化胎盘DNA可检测到单拷贝基因(tPA)。

地高辛引物标记优点:质粒、柯斯质粒和λ噬菌体DNA均可作为模板,模板DNA(线状或超螺旋)标记10ng-3µg引物都具有同样的标记效率。

产品组成成份:

• DIG-High Prime, 5x conc., 50 µl

• DIG-labeled Control DNA, 20 µl, (5 µg/ml) pBR328 (linearized with Bam HI)

• DNA Dilution Buffer, 3 x 1 ml

• Anti-digoxigenin-AP Conjugate, 100 µl

• NBT/BCIP Stock Solution, conc., 6 x 1 ml

• Blocking Solution, 10x conc., 4 x 100 ml

• DIG Easy Hyb Granules, 4 x 100 ml

Roche作为全球最大的生物技术公司,罗氏在抗肿瘤、抗病毒、炎症、代谢和中枢神经系统等领域拥有一流的差异化药物。罗氏在全球体外诊断和基于组织的肿瘤诊断市场中享有领导地位,同时也是糖尿病管理领域的先驱者。Roche公司生产的DIG标记DNA检测试剂盒在DNA、RNA和核酸点杂交等实验应用中有出色表现,特别是第二代试剂盒使用CSPD化学发光检测具有更高的准确度和灵敏性。上海金 山科研平台技术有限公司在中国代理销售Roche公司生产的地高辛标记DNA检测试剂盒,产品保证原装进口并按说明材料严格运输和存储,发货迅速,售后保障。同时公司还提供相产品的价格、性能和使用说明等信息咨询,我们秉承卓越服务理念为中国广大科研工作者提供最优质的产品和服务。

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