Peprotech 300-02重组人IFN-γ

产品规格：100μG

产品描述：

Peprotech 重组人干扰素IFN-γ是由CD4和CD8T淋巴细胞以及活化的NK细胞产生的酸不稳定干扰素。IFN-γ受体存在于大多数免疫细胞中，其通过增加I类MHC蛋白的表面表达来响应IFN-γ信号传导。这促进了抗原呈递给T辅助细胞（CD4 +）。抗原呈递细胞中的IFN-γ信号传导和识别抗原的B和T淋巴细胞调节免疫应答的抗原特异性阶段。另外，IFN-γ刺激许多淋巴细胞功能，包括巨噬细胞，NK细胞和嗜中性粒细胞的抗微生物和抗肿瘤反应。人IFN-γ是物种特异性的，仅在人和灵长类动物细胞中具有生物活性。重组人IFN-γ是含有144个氨基酸残基的16.8kDa蛋白质。

PeproTech细胞因子中不含载体蛋白（Carrier Protein）或其他添加剂（如BSA、HAS或蔗糖等），并且通常以最少量的盐来进行冻干处理，因此微量的细胞因子在冻干过程中会沉积于管内，形成很薄或不可见的蛋白层。所以我们建议在收到产品后，务必在开盖前先离心，使粘在管盖或管壁上的蛋白聚集于管底（此时能否见到白色沉淀均属正常现象）。

产品来源：大肠杆菌

欢迎您致电：金山科研平台

手机号 微信：jinshanbio 金山科 研平台-客服 QQ：1749072012

CIK 培养用细胞因子和抗体：

IFN-γ (干扰素-γ)

IFN-γ 具有上调外周血淋巴细胞表面IL-2R表达的作用，因此会增强T细胞对IL-2促增殖反应的敏感度和强度。在诱导CIK细胞形成的过程中加入IFN- γ ，可降低IL-2的用量。研究发现，IFN-γ加入的顺序与CIK的细胞毒活性密切相关。先加入IFN- γ，培养24后再加入IL-2，可明显提高CIK的细胞毒活性。

CIK 是“Cytokine-Induced Killer Cells”的缩写，中文全称为“细胞因子诱导的杀伤细胞”。CIK 是单个核细胞在CD3 单抗和多种细胞因子(包括IFN-γ, IL-2 等)的作用下培养获得的一群以CD3+CD56+细胞为主要效应细胞的异质细胞群， 其既具有T 淋巴细胞强大的抗肿瘤活性，又具有NK 细胞(自然杀伤细胞)的非MHC(主要组织相容性抗原)限制性肿瘤杀伤能力。CIK 细胞具有杀瘤活性高、杀瘤谱广，对正常组织毒性低，体外可高度扩增等特点，是目前临床上广泛使用的过继性免疫治疗细胞。

技术信息：

AA序列：MQDPYVKEAE NLKKYFNAGH SDVADNGTLF LGILKNWKEE SDRKIMQSQI VSFYFKLFKN FKDDQSIQKS VETIKEDMNV KFFNSNKKKR DDFEKLTNYS VTDLNVQRKA IHELIQVMAE LSPAAKTGKR KRSQMLFQGR RASQ纯度：通过SDS-PAGE凝胶和HPLC分析≥98％。

生物活性：该ED?50通过使用HT-29细胞细胞毒性分析来确定是≤0.05纳克/毫升，相当于≥2×10的比活性7单位/ mg。

交叉反应性：

细菌，鱼+病毒，人类，人类+细菌，人类+仓鼠，人类+小鼠，人类+病毒，Mandarin鱼，猴子，小鼠，N / A，猪，兔子，大鼠

可用于研究艾滋病，免疫系统 干细胞和分化

【细胞制备】

1． 外周血单个核细胞的采集

1.1 用血细胞分离机采集患者自身的外周血单个核细胞50-100mL；

1.2 淋巴细胞分离液密度梯度离心法进一步纯化单个核细胞(PBMC)；

1.3 无血清培养液洗涤2 次，获得纯度在90%以上的PBMC。

2． CIK 细胞的培养及鉴定

2.1 将PBMC 按1-2 x 106/ml 的浓度悬浮于无血清培养液中，加入1,000 U/ml 的重组人IFN-γ，37oC，5%CO2 培养箱中培养；

2.2 24h 后加入50ng/ml 的CD3 单克隆抗体和300 U/ml 的重组人IL-2，刺激CIK 细

胞的生长和增殖；

注：此时也可同时加入100 U/ml 的重组人IL-1α。

2.3 每3 天半量换液或扩瓶一次，并补加重组人IL-2 300 U/ml；

2.4 在培养的第14d，收获CIK 细胞。

2.5 CIK 细胞质控：

2.9.1 台盼蓝染色检测：活细胞应在80%以上；

2.9.2 流式细胞仪检测细胞表面CD3、CD8、CD56 等分子的表达：CD3+CD56+细胞的比例应在20%以上。

2.9.3 细胞杀伤实验：以CIK 细胞为效应细胞，以肿瘤细胞(可为原代肿瘤细胞或肿瘤细胞株)为靶细胞，将效应细胞与 靶细胞按10 : 1(数目比) 的比例加入96 孔U 型板中，每孔含靶细胞1 x 104 个，终体积为200 μl，设3 个复孔。 培养4h，然后取培养上清，用乳酸脱氢酶(LDH) 试剂盒检测效应细胞对靶细胞的杀伤率。

2.9.4 收获细胞前，取少量培养物进行细菌、真菌培养，并检测支原体、衣原体，及内毒素(标准：病原学检测阴性， 内毒素<5 Eu)。

提供产品：金山科研平台是一家为生命科学领域内的科学研究、细胞治疗和生物制药相关人员提供优质产品和服务的生物高科技公司，公司主办的干细胞搜网(www.stemcell.so)为中国干细胞领域最大资源库，网站提供：干细胞治疗产品、细胞培养试剂耗材、脐带MSC间充质干细胞培养基、IPS细胞ES胚胎干细胞培养基、DC细胞淋巴细胞无血清培养基、R&D细胞因子等种类丰富的产品；涉及StemCell、HY StemCell、StemRD、CellGenix、PeproTech、Corning、Thermo、Gibco、 PALL、LONZA、BD等国际知名公司品牌和生产厂家。以“Yes Service”核心服务理念，紧紧围绕“Yes Service focus on Biology 卓越服务 专注生物”打造中华民族全新服务体系，我们与客户携手一起探索生命科学奥秘，解决人类健康问题，发展绿色环保生态，推动世界和谐持续发展。

欢迎您致电：金山科研平台

手机号 微信：jinshanbio 金山科 研平台-客服 QQ：1749072012