酵母蛋白小量提取试剂盒 品牌SGGGO QQ:1749072012 P1140
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酵母蛋白小量提取试剂盒
一,试剂盒组份
组份 | (50T) | (100T) |
酵母裂解液 | 50mL | 100mL |
玻璃珠 | 3g | 6g |
PMSF(100X) | 1ml | 1ml |
β-巯基乙醇 | 1ml | 1ml |
二,说明
酵母蛋白小量提取试剂盒用于从酵母细胞中分提取可溶性各种蛋白。提取的蛋白可用于各种常规实验。如PAGE,Western,免疫沉淀(immunol precipitation,IP)和免疫共沉淀(co-IP)。酵母裂解液中不含任何去污剂,可用各种方法测定蛋白含量。
三,操作步骤
1. 酵母常规培养。
2. 离心收集酵母。大概50-100ul的积压体积。*弃上清。
3. 加入酵母裂解液,吹打重重悬。再次离心,弃上清(此步的目的是将酵母洗一下,也可以省掉此步)。
4. 在酵母菌中,再加入0.5ml裂解液,加入5ul PMSF,5ulβ-巯基乙醇(在通风处操作)。加入50mg左右的玻璃珠,预冷,涡流10min(每涡流1min,可以冰上冷却1min)。
5. 离心,取上清。进行下一步实验或者-70℃储存。
四,注意事项
1,不同的酵母可能须涡流时间不同,可根据实际情况延长或者缩短时间。(比如蛋白浓度高低,蛋白降解情况等。)
2,如果一个月内能够用完,可将β-巯基乙醇按照百分之一的量一次性全部加入酵母裂解液中。2-8度保存。
3,因为是采用物理方法破解酵母壁,所以对于酶等一些易失活蛋白可能并不适合。
4,为了你的实验安全,请戴手套操作。并注意通风。
金山科研平台授权一级代理,咨询微信:jinshanbio 金山禾斗石开平台位于北京市海淀区,是一家专业从事生化试剂、分子生物学试剂、实验耗材及实验仪器研发、销售、服务为一体的生物科技公司,公司主要经营的进口品牌包括Qiagen, Omega, Sigma, Invitrogen, Roche, Abcam, Santa cruz, Fermantas(MBI), NEB, BD, Peprotech, Abnova, R&D systerms, GE, Biovision, Millipore, Amresco, Merck, CST, Axygen, Corning, NUNC, Thermo fihser, Eppendorf等;产品涉及化工原料、生化试剂、分子克隆相关试剂、细胞培养及检测常用试剂、实验室常用耗材及仪器。
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