概述

糖苷内切酶H是一种重组糖苷酶，能够对N-糖蛋白中的高甘露糖型和某些杂合型寡聚糖的壳二糖核心结构进行切割（1）。

反应条件

在糖蛋白变性缓冲液（含5% SDS，40 mMDTT）中100℃煮沸10分钟使糖蛋白变性。在1X G5反应缓冲液[50 mM柠檬酸钠（pH 5.5 @ 25℃）]中于37℃温育，以进行酶解反应。

随酶提供的试剂

10X糖蛋白变性缓冲液10X G5缓冲液

分子量

Endo H：29 kDa

*

无外切糖苷酶污染，无蛋白水解活性。

单位定义

1单位指在10 μl的反应体系中，37℃条件下1小时从10 μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量（10 NEB units = 1 IUB milliunit）。

浓度

Endo H：500,000 units/ml

贮存条件

20 mMTris-HCl（pH 7.5 @ 25℃），50 mMNaCl和5 mM Na₂EDTA，贮存于-20℃。

使用注意

酶的活性不受SDS抑制。

要使天然糖蛋白去糖基化，或许需要增加酶量和延长温育时间。

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