赖氨酸-琼脂糖凝胶 4B C6H14N2O2 现货

赖氨酸-琼脂糖凝胶4B是利用溴化氰法通过赖氨酸的α-氨基将其键合在琼脂糖凝胶上，赖氨酸上游离的ε-氨基和α-羧基可以和一系列的生物分子相互作用。主要用于纤维蛋白溶酶原、血纤维蛋白溶酶原激活剂和核蛋白体核糖核酸的分离以及双链DNA的纯化。

基质：6% 交联琼脂糖凝胶

配基： 赖氨酸

配基密度：4-7μmol/mL

颗粒大小：45-165μm

每毫升结合量：0.6mg血纤维蛋白溶酶原

大流速：75cm/h

工作pH：2~11

化学稳定性：在所有的水溶性缓冲液中保持稳定；

操作温度：室温

赖氨酸-琼脂糖凝胶4B使用方法

1.装柱

（1）将所有的试剂和填料达到室温.配制初始缓冲液(平衡液)和缓冲液。

（2）根据柱子大小取所需凝胶的量，清洗掉20%乙醇，抽干，用初始缓冲液（按凝胶：缓冲液=3:1比例）配成匀浆。

（3）将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液体（液面略高于滤膜），务必使底端无气泡。

（4）用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内，注意不要使用气泡。打开柱子出液口，使凝胶在柱内自由沉降，连结好柱子顶端柱头。

（5）打开蠕动泵，让缓冲液用使用时流速的1.33倍的流速流过，使柱床稳定。用2-3倍柱体积的缓冲液平衡柱子。

2.平衡

让平衡缓冲液以一定流速流过柱子，到流出液电导和pH不变。

3.上样

可以根据上样物质的性质选择合适pH的缓冲液，通常建议使用pH 为7.5的磷酸盐缓冲液。

4.洗脱

通常使用高2M浓度的盐溶液进行洗脱，也可以选择梯度洗脱或者温度梯度洗脱。

5.再生

再生取决于样品的性质，赖氨酸琼脂糖4 B可以用2 - 3床体积的高pH值(0.1 M Tris-HCl，0.5 M氯化钠，pH值8.5)和低pH值(0.1 M醋酸钠，0.5 M氯化钠，pH值4.5)交替洗涤再生。重复3次，缓冲液每次至少5柱床体积。

如果在分离的过程中使用了去垢剂或者变性剂，在再生的过程中也可以使用。

纯化纤溶酶原后，应该使用pH为7.5的 50 mM（含有1 M氯化钠和0.2 M ε-氨己酸）的磷酸盐再生。核酸纯化后，用至少5倍柱体积的pH为7.5的的50 mM的磷酸盐（含2 M氯化钠）清洗再生。

6.在位清洗

在一些使用的程序中，如果存在不容易洗脱的沉淀蛋白或者脂类物质，可以用

0.1%的Triton冲洗一分钟，清洗完毕后，立刻用至少5倍柱体积缓冲液平衡柱子。

赖氨酸-琼脂糖凝胶4B注意事项

（1）冻干的赖氨酸琼脂糖凝胶4B 密封贮存于8°C以下干燥的地方，溶胀的凝胶应贮存在4-8°C（保存溶液为20%乙醇），不能冷冻。

（2）在装柱、使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干，气泡进入。