Con A 琼脂糖凝胶 4B
ConA-琼脂糖凝胶4B是将伴刀豆球蛋白(Con A)偶联到交联及活化的琼脂糖凝胶上, 该填料具有很高的化学稳定性。 Con A能和各类带甘露醇及葡萄糖残基的糖、糖蛋白、糖脂,所以Con A 琼脂糖凝胶可以用于这类物 质的分离纯化。 本产品稳定性好,基团脱落少,使用寿命长,使用方便,应用广泛。
二、 亲和填料特性
特点 基团脱落少,结合特异性强
基质 4%的交联琼脂糖凝胶
配基 Con A
配基密度 5-10mg/ml
载量 10-25mg甲状腺球蛋白
亲和填料的颗粒大小 45-165μm
大流速 100cm/h
pH范围 4-9
使用温度 4℃~常温
保存温度 +4~8℃
保存液体 20%乙醇
三、 适用范围 Con A 琼脂糖凝胶用于各种带甘露醇及葡萄糖残基的糖、糖蛋白、糖脂的分离纯化。
四、 亲和填料应用的注意事项
(1)该凝胶从冷室或冰箱中取出后在室温下缓慢振摇恢复到室温,然后再装柱,以免产生气泡影 响柱效。
(2)吸附:10-30Tris-HCl缓冲液,pH7.5,其中含有0.2M NaCl,2mM MnCl2,2mM CaCl2。平衡10 个柱子床体积。
(3)洗脱:可以用pH4.5-6的缓冲液洗脱,也可以用100-500mM糖类竞争线性或阶段洗脱,例如用甲 基葡萄糖等甲基吡喃糖,其中缓冲液可以是10-30Tris-HCl缓冲液,pH7.5,含有0.2M NaCl.洗脱多可以到 10个柱床体积。
(4)上样样品必须与平衡柱子的缓冲液pH、电导相同。
(5)Con A 琼脂糖凝胶FF亲和填料的再生处理方法:先用0.1M Tris-HCl pH8.5缓冲液洗含0.2M NaCl 洗10个柱床体积,然后用20mM 醋酸缓冲液,pH 4.5洗3个床体积,后用20%乙醇洗 3个床体积即可。
(6)对于吸附力强的物质可以用0.1M硼酸盐缓冲液,pH6.5低流速洗3-5个柱床体积。也可以用乙醇线 性洗脱20-50%。
(7)该亲和填料保存条件为20%乙醇,+4~8℃。
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