凯杰Qiagen74134总RNA小提试剂盒RNeasy Plus Mini Kit 50T

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74134凯杰Qiagen总RNA小提试剂盒50TRNeasy Plus Mini Kit ，产品介绍： 产品品牌：Qiagen 产品货号：74134 产品名称：总RNA小提试剂盒 英文名称：RNeasy Plus Mini Kit 产品规格：50T

74134凯杰Qiagen总RNA小提试剂盒50TRNeasy Plus Mini Kit，产品说明：

特征

l 使用du特的gDNA消除柱或板高效去除gDNA（无需DNase）

l 使用快速简单的提取方案在几分钟内获得高质量的总RNA

l 无酚RNA分离

l 96孔形式的高通量处理

l 适用于实时 RT-PCR 和 RNA-seq 等敏感应用

产品详情

RNeasy Plus 试剂盒是下一代 QIAGEN RNA 提取试剂盒，将高质量 RNA 纯化与du特的 gDNA 消除柱或板的有效 gDNA 去除相结合。从各种培养细胞和易于裂解的组织中获得高纯度和高产量的总RNA。RNeasy Plus 微量试剂盒专为数量有限的样品而设计，可分离出高达 45 μg 纯总 RNA RNeasy Plus 迷你试剂盒可从单次提取中纯化高达 100 μg 的总 RNA （>200 nt），并具有高效的 gDNA 去除功能。两种试剂盒都可以在QIAcube Connect上实现自动化，并且可以使用RNAprotect组织试剂或Allprotect组织试剂方便地稳定样品，并使用TissueRuptor II或TissueLyser II或LT系统（单独提供）有效地破碎样品。RNeasy Plus 96 试剂盒用于从 96 孔板中生长的培养细胞中高通量纯化总 RNA。为了获得最佳效果，建议将本产品与QIAvac 96系统一起使用。

Performance

使用 RNeasy Plus 微型和迷你试剂盒从细胞和组织中提取 RNA，可实现高、可重复的 RNA 产量和高效的基因组 DNA 消除，适用于敏感应用。常规从组织和培养细胞中获取安捷伦 RIN 值接近 10 的总 RNA。

RNeasy Plus 微量和迷你试剂盒还可富集 mRNA，因为大多数 RNA <200 个核苷酸（如 rRNA 和 tRNA）被排除在外。为了从培养的细胞中分离含有小RNA（例如miRNA）的总RNA，可以使用其他RNA分离方案，并在RNeasy Plus微型手册中描述，并作为RNeasy Plus迷你试剂盒的单独补充方案。

RNeasy Plus 96 试剂盒与多种细胞系兼容，可纯化安捷伦 RIN 值接近 10 的高质量 RNA。通过试剂盒wan全去除基因组DNA可在高灵敏度应用中进行特异性转录本检测，例如低丰度靶标的定量实时RT-PCR分析。此外，从102到106细胞的可靠RNA纯化允许在宽动态范围内进行实时RT-PCR定量。

Principle

RNeasy Plus程序将QIAGEN用于双链DNA选择性结合的创新技术与成熟的RNeasy技术相结合。保证高质量RNA的高效纯化，无需额外的DNA酶消化。纯化的RNA即用型，非常适合对少量DNA污染敏感的下游应用，例如定量实时RT-PCR。

细胞和易于裂解的组织首先在高度变性的含异硫氰酸胍的缓冲液RLT Plus中裂解和匀浆，该缓冲液可立即灭活RNA酶以确保分离完整的RNA。然后将裂解物通过gDNA消除器离心柱或gDNA消除器96板，该板与高盐缓冲液结合使用，选择性地有效地去除基因组DNA。加入乙醇以提供适当的RNA结合条件，并将样品施加到RNeasy离心柱或96孔板上。这些专用色谱柱和 96 孔板含有硅胶膜，可特异性结合裂解细胞的 RNA。

对于脂肪和难以裂解的组织，建议使用 RNeasy Plus 通用试剂盒。为了从其他样品类型中分离总RNA（包括miRNA），我们建议使用miRNeasy试剂盒。

Procedure

RNeasy Plus 微量试剂盒可从多达 5 x 10 5 个细胞或5 mg 组织中纯化总 RNA，RNeasy Plus 迷你试剂盒可从多达 10 个7 个细胞或 30 mg 组织中分离总 RNA。短的工作流程可在不到 25 分钟的时间内完成 RNA 分离和基因组 DNA 去除。首先裂解样品并进行均质化。裂解物通过gDNA消除器离心柱，将乙醇添加到流通中，并将样品施加到RNeasy离心柱上。RNA与膜结合，污染物被冲走。使用 RNeasy Plus 微量试剂盒在低至 14 μl 水中洗脱高质量 RNA，或使用 RNeasy Plus 迷你试剂盒在 30 μl 水中洗脱。

不同的实验方案可用于不同的起始材料。该方案的主要区别在于样品的裂解和均质化。一旦将样品应用于gDNA消除器离心柱，实验方案就相似了。该程序为mRNA提供了富集，因为大多数RNA<200个核苷酸（如rRNA和tRNA）被排除在外。

在 RLT Plus 缓冲液（随 RNeasy Plus 迷你试剂盒随附）中破碎和均质组织时，可能会出现过度起泡。通过在开始破碎和均质化之前将试剂DX（单独提供）添加到缓冲液RLT Plus中，可以大大减少这种起泡。试剂DX已使用试剂盒进行了仔细测试，对RNA纯度或下游应用没有影响。

通过使用RNeasy 96板实现高通量RNA纯化。在应用于RNeasy 96板之前，细胞裂解物首先通过gDNA消除器96板。gDNA 消除器 96 板使用离心机（离心机 4-16）方便地进行处理。使用 RNeasy 96 板进行 RNA 纯化是手动的，包括 3 个简单步骤：结合、洗涤和洗脱。使用离心机（离心机4-16和板转子2 x 96）或真空（QIAvac 96）和离心机的组合可以快速方便地处理板。使用离心机处理板时，最多可使用2 x 10 6个细胞作为起始材料，而使用真空和离心机处理板时，最多可使用1 x 106个细胞。该程序为mRNA提供了富集，因为大多数RNA<200个核苷酸（如rRNA和tRNA）被排除在外。可以修改RNeasy Plus程序，以允许从培养的细胞中纯化含有小RNA（例如miRNA）的总RNA。

Applications

使用 RNeasy Plus 试剂盒纯化的 RNA 非常适合对少量 DNA 污染敏感的下游应用，例如 RNA-seq 和定量实时 RT-PCR。纯化的RNA也可用于其他应用。

RNeasy Plus 微量试剂盒适用于小样品，包括：

l 激光显微解剖冷冻切片

l 细针抽吸物

RNeasy Plus 96 试剂盒易于纯化 96 孔格式的 RNA，非常适合以下领域的高通量基因表达分析：

l 药物发现

l 生物医学研究

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